지금의 경상북도 청도군 이서면과 화양읍 일대에 있었던 것으로 비정된다. 다른 성읍국가와 마찬가지로 이서국에 대해서도 문헌에는 별로 보이지 않고 있다.
『동국여지승람』 권26 청도군 건치연혁조(建置沿革條)에 의하면, 신라 제3대왕인 유리왕 때 멸망하고 그 뒤 솔이산(率伊山)·경산(驚山)·오도산(烏刀山)에 있는 세 성과 합쳐 대성군(大城郡)이 되었다고 한다. 또 『삼국유사』 권1 이서국조에 보면, 신라 제3대왕인 유리왕 14년(37)에 이서 사람이 금성(金城)을 쳤다고 되어 있다.
그러나 『삼국사기』 권2에는 유례이사금 14년(297)에 이서국이 신라를 침공하자 신라는 대병으로 막았으나 이를 물리치지 못하였다. 이 때 홀연히 이병(異兵)이 나타나 신라병과 연합하여 이를 물리치게 되었는데, 이 이병이 어디로 사라졌는지를 알 수 없었다고 한다.
그런데 사람들은 선왕인 미추왕의 왕릉인 죽현릉(竹現陵)에 죽엽(竹葉)이 쌓인 것을 보고, 선왕이 음병으로 신라를 도운 것으로 믿었다고 한다. 또, 『삼국유사』 권1 미추왕 죽엽군조(味鄒王竹葉軍條)에도 비슷한 내용이 기록되어 있다.
앞에서 본 신라 제3대 유리왕 14년과 제14대 유례왕 14년의 기사내용이 서로 비슷하면서 시대를 달리한 것은 기록 차이로 생각된다. 이처럼 이서국의 멸망시기를 정확히 알 수 없으나, 제14대 유례왕 때까지 성읍국가로 존속해 오다가 신라에 멸망당한 것으로 생각하는 것이 옳은 듯하다.